Con el objetivo de ampliar la acreditación del laboratorio de química del Centro de Investigaciones Oceanográficas e Hidrográficas  (CIOH), se está implementando un sistema de calidad con el que se busca validar las metodologías que desarrolla el laboratorio con respecto a la exactitud, precisión, repetibilidad, reproducibilidad, robustez, alta sensibilidad y selectividad mediante el MPO – 02.04 Validación de Métodos de Ensayo. Una de las validaciones que se está llevando a cabo es la ‘Determinación de Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO5) y  Nitrógeno Total Kjeldahl (NKT)’.
 

La Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO5) es un análisis usado para determinar los requerimientos de oxígeno necesarios para la degradación bioquímica de la materia orgánica en las aguas naturales, marinas, estuarinas, residuales domésticas e industriales. La temperatura seleccionada es de 20  1.0 0C, un valor aproximado al que se da en los cuerpos naturales de agua. 

Aunque para oxidación completa se requiere un tiempo infinito, en términos  prácticos se considera que la reacción se completa en 20 dias; sin embargo, por ser este un período muy largo, la experiencia ha demostrado que aproximadamente entre el 70 y 80 % de la DBO5 se ejerce en 5 dias, razón por la cual el análisis se ha establecido en este tiempo.

El método consiste en llenar con muestras de agua en frascos Winkler de 300 ml, por un período de incubación en la oscuridad a 20   1.0 ºC por 5 dias. Se hace una medición inicial del Oxígeno Disuelto (OD) en el frasco  y otra al finalizar el período de incubación.

Algunas muestras no contienen una población microbiana suficiente, como es le caso de los efluentes industriales sin tratamiento, aguas desinfectadas, efluentes con elevada temperatura o con valores extremos de pH; por tanto deben inocularse por adición de una población adecuada de microorganismos. En el laboratorio se valida esta metodología utilizando como semilla Polyseed, unas bacterias especializadas que están dando buenos resultados y se usan como patrón de referencia de glucosa-ácido glutámico para el control de calidad del método.

Por otro lado, el Método Kjeldahl es el más común para determinar el nitrógeno en estado trinegativo. Las formas de nitrógeno que se pueden presentar en aguas naturales y residuales son: nitratos, nitritos, amoníaco y nitrógeno orgánico, los cuales pueden ser convertidos bioquímicamente a través del ciclo del nitrógeno.

Analíticamente, el nitrógeno orgánico y amoniacal pueden determinarse juntos generando el Nitrógeno Kjeldahl, nombre dado por la técnica que utiliza. En el método, la muestra se descompone mediante digestión y el nitrógeno amino de la mayoría de compuestos y  el amoniaco libre son convertidos en amonio, en presencia de ácido sulfúrico (H2SO4) luego la solución se enfría y se alcaliniza con NaOH al 32 %. El amoníaco liberado es destilado desde el medio alcalino. y recogidos los vapores en un exceso de ácido bórico, para ser cuantificado volumétricamente con H2SO4 estándar.

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